Τεστ αντισωμάτων HIV/HCV (Trilines)

Οι συνήθεις μέθοδοι για την ανίχνευση αντισωμάτων κατά του AIDS είναι:
1. Ανίχνευση παθογόνου
Η ανίχνευση παθογόνου αναφέρεται κυρίως στην άμεση ανίχνευση ιών ή ιικών γονιδίων από δείγματα ξενιστή με απομόνωση και καλλιέργεια ιού, παρατήρηση μορφολογίας ηλεκτρονικών μικροσκοπικών, ανίχνευση αντιγόνου ιού και προσδιορισμό γονιδίων.Οι δύο πρώτες μέθοδοι είναι δύσκολες και απαιτούν ειδικό εξοπλισμό και επαγγελματίες τεχνικούς.Επομένως, μόνο η ανίχνευση αντιγόνου και η RT-PCR (reverse transcription PCR) μπορούν να χρησιμοποιηθούν για κλινική διάγνωση.
2. Ανίχνευση αντισωμάτων
Το αντίσωμα HIV στον ορό είναι ένας έμμεσος δείκτης μόλυνσης από τον ιό HIV.Σύμφωνα με το κύριο πεδίο εφαρμογής του, οι υπάρχουσες μέθοδοι ανίχνευσης αντισωμάτων HIV μπορούν να χωριστούν σε δοκιμασία προσυμπτωματικού ελέγχου και δοκιμή επιβεβαίωσης.
3. Αντιδραστήριο επιβεβαίωσης
Το Western blot (WB) είναι η πιο συχνά χρησιμοποιούμενη μέθοδος για την επιβεβαίωση του θετικού ορού του τεστ προσυμπτωματικού ελέγχου.Λόγω της σχετικά μεγάλης περιόδου παραθύρου, της κακής ευαισθησίας και του υψηλού κόστους, αυτή η μέθοδος είναι κατάλληλη μόνο για δοκιμή επιβεβαίωσης.Με τη βελτίωση της ευαισθησίας των διαγνωστικών αντιδραστηρίων HIV τρίτης και τέταρτης γενιάς, το WB καθίσταται ολοένα και πιο ανίκανο να ανταποκριθεί στις απαιτήσεις για τη χρήση του ως επιβεβαιωτική εξέταση.
Ένας άλλος τύπος αντιδραστηρίου επιβεβαίωσης διαλογής που έχει εγκριθεί από την FDA είναι η δοκιμασία ανοσοφθορισμού (IFA).Το IFA κοστίζει λιγότερο από το WB και η λειτουργία είναι σχετικά απλή.Η όλη διαδικασία μπορεί να ολοκληρωθεί μέσα σε 1-1,5 ώρα.Το κύριο μειονέκτημα αυτής της μεθόδου είναι ότι απαιτεί ακριβούς ανιχνευτές φθορισμού και έμπειρους επαγγελματίες για την παρακολούθηση των αποτελεσμάτων αξιολόγησης και τα πειραματικά αποτελέσματα δεν μπορούν να διατηρηθούν για μεγάλο χρονικό διάστημα.Τώρα η FDA συνιστά να υπερισχύουν τα αρνητικά ή θετικά αποτελέσματα της IFA κατά την έκδοση των τελικών αποτελεσμάτων σε δότες των οποίων το WB δεν μπορεί να προσδιοριστεί, αλλά δεν θεωρείται ως το πρότυπο για την πιστοποίηση αίματος.
4. Έλεγχος προσυμπτωματικού ελέγχου
Το τεστ προσυμπτωματικού ελέγχου χρησιμοποιείται κυρίως για τον έλεγχο των αιμοδοτών, επομένως απαιτεί απλή λειτουργία, χαμηλό κόστος, ευαισθησία και ειδικότητα.Προς το παρόν, η κύρια μέθοδος διαλογής στον κόσμο εξακολουθεί να είναι η ELISA και υπάρχουν μερικά αντιδραστήρια συγκόλλησης σωματιδίων και αντιδραστήρια ταχείας ELISA.
Το ELISA έχει υψηλή ευαισθησία και ειδικότητα και είναι απλό στη λειτουργία του.Μπορεί να εφαρμοστεί μόνο εάν το εργαστήριο είναι εξοπλισμένο με συσκευή ανάγνωσης μικροπλακών και πλυστικό πλακών.Είναι ιδιαίτερα κατάλληλο για μεγάλης κλίμακας προληπτικό έλεγχο στο εργαστήριο.
Η δοκιμή συγκόλλησης σωματιδίων είναι μια άλλη απλή, βολική και χαμηλού κόστους μέθοδος ανίχνευσης.Τα αποτελέσματα αυτής της μεθόδου μπορούν να κριθούν με γυμνά μάτια και η ευαισθησία είναι πολύ υψηλή.Είναι ιδιαίτερα κατάλληλο για αναπτυσσόμενες χώρες ή μεγάλο αριθμό αιμοδοτών.Το μειονέκτημα είναι ότι πρέπει να χρησιμοποιούνται φρέσκα δείγματα και η ειδικότητα είναι κακή.
Κλινικά αντισώματα ιού ηπατίτιδας C:
1) Το 80-90% των ασθενών που πάσχουν από ηπατίτιδα μετά από μετάγγιση αίματος είναι ηπατίτιδα C, οι περισσότεροι από αυτούς είναι θετικοί.
2) Σε ασθενείς με ηπατίτιδα Β, ειδικά εκείνοι που χρησιμοποιούν συχνά προϊόντα αίματος (πλάσμα, πλήρες αίμα) μπορεί να προκαλέσουν συνλοίμωξη από τον ιό της ηπατίτιδας C, κάνοντας τη νόσο να γίνει χρόνια, κίρρωση ήπατος ή καρκίνο του ήπατος.Επομένως, το HCV Ab θα πρέπει να ανιχνεύεται σε ασθενείς με υποτροπιάζουσα ηπατίτιδα Β ή σε ασθενείς με χρόνια ηπατίτιδα.