Λεπτομερής περιγραφή
Western blot (WB), ανοσοδοκιμασία ταινίας (LIATEK HIV Ⅲ), δοκιμασία ραδιοανοσοκαθίζησης (RIPA) και δοκιμασία ανοσοφθορισμού (IFA).Η συνήθως χρησιμοποιούμενη μέθοδος δοκιμής επικύρωσης στην Κίνα είναι η WB.
Το (1) Western blot (WB) είναι μια πειραματική μέθοδος που χρησιμοποιείται ευρέως στη διάγνωση πολλών μολυσματικών ασθενειών.Όσον αφορά την αιτιολογική διάγνωση του HIV, είναι η πρώτη πειραματική μέθοδος επιβεβαίωσης που χρησιμοποιείται για την επιβεβαίωση των αντισωμάτων HIV.Τα αποτελέσματα ανίχνευσης του WB χρησιμοποιούνται συχνά ως το «χρυσό πρότυπο» για τον εντοπισμό των πλεονεκτημάτων και των μειονεκτημάτων άλλων μεθόδων δοκιμών.
Διαδικασία δοκιμής επιβεβαίωσης:
Υπάρχουν HIV-1/2 μικτού τύπου και απλού τύπου HIV-1 ή HIV-2.Αρχικά, χρησιμοποιήστε το μικτό αντιδραστήριο HIV-1/2 για να δοκιμάσετε.Εάν η αντίδραση είναι αρνητική, αναφέρετε ότι το αντίσωμα HIV είναι αρνητικό.Εάν είναι θετικό, θα αναφέρει ότι είναι θετικό στο αντίσωμα HIV-1.Εάν δεν πληρούνται τα θετικά κριτήρια, κρίνεται ότι το αποτέλεσμα του τεστ αντισωμάτων HIV είναι αβέβαιο.Εάν υπάρχει μια συγκεκριμένη ζώνη δείκτη του HIV-2, πρέπει να χρησιμοποιήσετε αντιδραστήριο ανοσοστύπωσης HIV-2 για να πραγματοποιήσετε ξανά τη δοκιμή επιβεβαίωσης αντισώματος HIV 2, η οποία δείχνει αρνητική αντίδραση και να αναφέρετε ότι το αντίσωμα HIV 2 είναι αρνητικό.Εάν είναι θετικό, θα αναφέρει ότι είναι ορολογικά θετικό για το αντίσωμα HIV-2 και θα αποστείλει το δείγμα στο εθνικό εργαστήριο αναφοράς για ανάλυση αλληλουχίας νουκλεϊκών οξέων,
Η ευαισθησία του WB γενικά δεν είναι χαμηλότερη από αυτή της προκαταρκτικής δοκιμασίας διαλογής, αλλά η ειδικότητά του είναι πολύ υψηλή.Αυτό βασίζεται κυρίως στον διαχωρισμό, τη συγκέντρωση και τον καθαρισμό διαφορετικών συστατικών αντιγόνου HIV, τα οποία μπορούν να ανιχνεύσουν αντισώματα έναντι διαφορετικών συστατικών αντιγόνου, επομένως η μέθοδος WB μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον προσδιορισμό της ακρίβειας της προκαταρκτικής δοκιμής διαλογής.Μπορεί να φανεί από τα αποτελέσματα της δοκιμής επιβεβαίωσης WB ότι παρόλο που τα αντιδραστήρια καλής ποιότητας επιλέγονται για την προκαταρκτική δοκιμή διαλογής, όπως η ELISA τρίτης γενιάς, θα εξακολουθούν να υπάρχουν ψευδώς θετικά και ακριβή αποτελέσματα μπορούν να ληφθούν μόνο μέσω της δοκιμής επιβεβαίωσης.
(2) Δοκιμασία ανοσοφθορισμού (IFA)
Η μέθοδος IFA είναι οικονομική, απλή και γρήγορη και έχει προταθεί από τον FDA για τη διάγνωση αβέβαιων δειγμάτων WB.Ωστόσο, απαιτούνται ακριβά μικροσκόπια φθορισμού, απαιτούνται καλά εκπαιδευμένοι τεχνικοί και τα αποτελέσματα παρατήρησης και ερμηνείας επηρεάζονται εύκολα από υποκειμενικούς παράγοντες.Τα αποτελέσματα δεν πρέπει να διατηρούνται για μεγάλο χρονικό διάστημα και το IFA δεν πρέπει να πραγματοποιείται και να εφαρμόζεται σε γενικά εργαστήρια.
Αναφορά αποτελεσμάτων δοκιμών επιβεβαίωσης αντισωμάτων HIV
Τα αποτελέσματα της δοκιμής επιβεβαίωσης αντισωμάτων HIV θα αναφέρονται στον συνημμένο Πίνακα 3.
(1) Συμμορφωθείτε με τα θετικά κριτήρια κρίσης για το αντίσωμα HIV 1, αναφέρετε "HIV 1 αντίσωμα θετικό (+)" και κάντε καλή δουλειά με τη συμβουλή μετά τη δοκιμή, την εμπιστευτικότητα και την αναφορά επιδημικής κατάστασης όπως απαιτείται.Συμμορφωθείτε με τα θετικά κριτήρια κρίσης για το αντίσωμα HIV 2, αναφέρετε «θετικό αντίσωμα HIV 2 (+)» και κάντε καλή δουλειά μετά τη συμβουλή μετά τη δοκιμή, την εμπιστευτικότητα και την αναφορά επιδημικής κατάστασης όπως απαιτείται.
(2) Συμμορφωθείτε με τα αρνητικά κριτήρια κρίσης για τα αντισώματα HIV και αναφέρετε «αρνητικό αντίσωμα HIV (-)».Σε περίπτωση υποψίας λοίμωξης «περίοδος παραθύρου», συνιστάται περαιτέρω έλεγχος νουκλεϊκού οξέος HIV για να γίνει σαφής διάγνωση το συντομότερο δυνατό.
(3) Συμμορφωθείτε με τα κριτήρια για αβεβαιότητα αντισωμάτων HIV, αναφέρετε «Αβεβαιότητα αντισωμάτων HIV (±)» και σημειώστε στις παρατηρήσεις ότι «περιμένετε για επανέλεγχο μετά από 4 εβδομάδες».