ΠΕΡΙΛΗΨΗ ΚΑΙ ΕΞΗΓΗΣΗ ΤΟ ΤΕΣΤ
Η ελονοσία είναι μια αιμολυτική, εμπύρετη ασθένεια που μεταδίδεται από τα κουνούπια που μολύνει πάνω από 200 εκατομμύρια ανθρώπους και σκοτώνει περισσότερους από 1 εκατομμύριο ανθρώπους ετησίως.Προκαλείται από τέσσερα είδη Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale και P. malariae.Όλα αυτά τα πλασμίδια μολύνουν και καταστρέφουν τα ανθρώπινα ερυθροκύτταρα, προκαλώντας ρίγη, πυρετό, αναιμία και σπληνομεγαλία.Το P. falciparum προκαλεί πιο σοβαρή ασθένεια από τα άλλα πλασμωδιακά είδη και ευθύνεται για τους περισσότερους θανάτους από ελονοσία.Το P. falciparum και το P. vivax είναι τα πιο κοινά παθογόνα, ωστόσο, υπάρχει σημαντική γεωγραφική διαφοροποίηση στην κατανομή των ειδών.
Παραδοσιακά, η ελονοσία διαγιγνώσκεται με την επίδειξη των οργανισμών σε χρωματισμένα με Giemsa παχιά επιχρίσματα περιφερικού αίματος και τα διάφορα είδη πλασμωδίου διακρίνονται από την εμφάνισή τους σε μολυσμένα ερυθροκύτταρα.Η τεχνική είναι ικανή για ακριβή και αξιόπιστη διάγνωση, αλλά μόνο όταν εκτελείται από έμπειρους μικροσκόπους χρησιμοποιώντας καθορισμένα πρωτόκολλα, τα οποία αποτελούν σημαντικά εμπόδια για τις απομακρυσμένες και φτωχές περιοχές του κόσμου.
Το Rapid Test Malaria Pf/Pv Ag έχει αναπτυχθεί για την επίλυση αυτών των εμποδίων.Χρησιμοποιεί αντισώματα ειδικά για την πρωτεΐνη-II πλούσια σε ιστιδίνη P. falciparum (pHRP-II) και για την αφυδρογονάση γαλακτικής P. vivax (Pv-LDH) για την ταυτόχρονη ανίχνευση και διαφοροποίηση της μόλυνσης με P. falciparum και P. vivax.Η δοκιμή μπορεί να πραγματοποιηθεί από μη εκπαιδευμένο ή ελάχιστα εξειδικευμένο προσωπικό, χωρίς εργαστηριακό εξοπλισμό
ΑΡΧΗ
Η ταχεία δοκιμή ελονοσίας Pf/Pv Ag είναι μια χρωματογραφική ανοσοδοκιμασία πλευρικής ροής.Τα συστατικά της δοκιμής ταινίας αποτελούνται από: 1) ένα συζευγμένο επίθεμα χρώματος μπορντό που περιέχει αντίσωμα ποντικού anti-Pv-LDH συζευγμένο με κολλοειδές χρυσό (Pv-LDH-gold conjugates) και αντίσωμα ποντικού anti-pHRP-II συζευγμένο με κολλοειδές χρυσό (pHRP-II-gold stride conjugates two strip strip strip a gold ζώνες v και Pf) και μια ζώνη ελέγχου (ζώνη C).Η ζώνη Pv είναι προεπικαλυμμένη με άλλο ειδικό αντίσωμα αντι-Pv-LDH ποντικού για την ανίχνευση μόλυνσης από Pv, η ζώνη Pf είναι προεπικαλυμμένη με πολυκλωνικά αντισώματα αντι-pHRP-II για την ανίχνευση μόλυνσης από Pf και η ζώνη C επικαλύπτεται με IgG αντι-ποντικού κατσίκας.
Κατά τη διάρκεια της δοκιμασίας, ένας επαρκής όγκος του δείγματος αίματος διανέμεται στο φρεάτιο δείγματος (S) της δοκιμαστικής κασέτας, ένα ρυθμιστικό διάλυμα λύσης προστίθεται στο φρεάτιο ρυθμιστικού διαλύματος (Β).Το ρυθμιστικό περιέχει ένα απορρυπαντικό που λύει τα ερυθρά αιμοσφαίρια και απελευθερώνει διάφορα αντιγόνα, τα οποία μεταναστεύουν με τριχοειδική δράση κατά μήκος της λωρίδας που διατηρείται στην κασέτα.Το Pv-LDH εάν υπάρχει στο δείγμα θα συνδεθεί με τα συζεύγματα Pv-LDH-χρυσού.Στη συνέχεια, το ανοσοσύμπλεγμα δεσμεύεται στη μεμβράνη από το προεπικαλυμμένο αντίσωμα αντι-Pv-LDH, σχηματίζοντας μια μπορντώ λωρίδα Pv, υποδεικνύοντας ένα θετικό αποτέλεσμα δοκιμής Pv.Εναλλακτικά, το pHRP-II εάν υπάρχει στο δείγμα θα συνδεθεί με τα συζεύγματα pHRP-II-χρυσού.Στη συνέχεια, το ανοσοσύμπλεγμα δεσμεύεται στη μεμβράνη από τα προεπικαλυμμένα αντισώματα αντι-pHRP-II, σχηματίζοντας μια μπορντώ ζώνη Pf, υποδεικνύοντας ένα θετικό αποτέλεσμα δοκιμής Pf.Η απουσία οποιωνδήποτε ζωνών δοκιμής υποδηλώνει αρνητικό αποτέλεσμα.Η δοκιμή περιέχει έναν εσωτερικό μάρτυρα (ζώνη C) που θα πρέπει να εμφανίζει μια μπορντώ ζώνη του ανοσοσυμπλέγματος των συζεύξεων κατσίκας αντι-ποντικού IgG / ποντικού IgG (anti-Pv-LDH και αντι-pHRPII)-χρυσού ανεξάρτητα από την ανάπτυξη χρώματος σε οποιαδήποτε από τις δοκιμαστικές ταινίες.Διαφορετικά, το αποτέλεσμα της δοκιμής δεν είναι έγκυρο και το δείγμα πρέπει να επανεξεταστεί με άλλη συσκευή.
